%0 Journal Article
%T 人巨细胞病毒编码蛋白pUL23在E.coliBL21(DE3)中的表达和纯化
%A 李婧惠
%A 刘明亮
%A 李继东
%A 张忠明
%A 冉艳红
%A 周天鸿
%A 李弘剑
%J 生物技术通报
%P 119-123
%D 2012
%X 大肠杆菌中高效表达携带组氨酸标签的人巨细胞病毒皮层蛋白pUL23,并进行纯化以及鉴定。提取感染HCMVTowne病毒株的HFF细胞的总RNA,逆转录为cDNA作为模板,经PCR获得UL23的基因片段,将此片段插入表达载体pET-28a(+),构建pET28a(+)-UL23重组质粒。将pET28a(+)-UL23转化至大肠杆菌BL21(DE3),进行IPTG诱导表达。表达产物经Westernblotting分析后进行发酵,再用Nisepharose亲和层析纯化,纯化产物进行SDS-PAGE和Westernblotting检测。结果表明,成功构建pET28a(+)-UL23原核表达载体,表达及纯化了His-pUL23融合蛋白,为进一步研究pUL23奠定基础。
%K 人巨细胞病毒
%K pUL23
%K 原核表达
%K 纯化
%K 组氨酸标签
%U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract6586.shtml