%0 Journal Article
%T 德国小蠊变应原Blag8的克隆表达及进化分析
%A 龙高群
%A 张春林
%J 生物技术通报
%P 173-178
%D 2012
%X 通过5'-RACE获得德国小蠊变应原Blag8基因的全长cDNA序列,进行生物信息学分析,构建原核表达载体,诱导重组蛋白表达,建立系统进化树,为进一步研究奠定基础。通过5'-RACE技术,PCR扩增获取编码德国小蠊变应原Blag8蛋白的全长cDNA序列;采用生物信息学方法分析预测Blag8蛋白的信号肽、疏水性、跨膜区、二级结构、三级结构;建立系统进化树;构建原核表达载体pET32a-B8,IPTG诱导重组蛋白表达,并用His-tag抗体Westernblotting验证。结果显示,获得编码德国小蠊变应原Blag8的全长cDNA序列,其完整阅读框含618个碱基,编码205个氨基酸。序列分析显示该蛋白,肌球蛋白轻链,具有EF手蛋白保守功能域。IPTG诱导获得重组蛋白。获得德国小蠊Blag8的完整cDNA序列,成功构建重组原核表达质粒pET32a-B8,并表达出融合蛋白。
%K 德国小蠊
%K 变应原
%K 序列分析
%K 原核表达
%U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract6574.shtml