%0 Journal Article %T RNAi沉默STAT3基因对人大细胞肺癌细胞增殖的影响 %A 夏武 %A 贾岩龙 %A 朱武凌 %A 程娜 %A 陈永凤 %A 刘巨源 %J 生物技术通报 %P 183-188 %D 2012 %X 旨在研究RNAi沉默STAT3基因对人大细胞肺癌NCI-H460细胞增殖的影响。针对STAT3基因mRNA设计合成5条短发夹DNA,构建重组SiRNA-ST3质粒(命名为SiRNA-ST3-1,2,3,4,N)。用重组质粒分别转染NCI-H460细胞,RT-PCR法检测转染24h后STAT3mRNA的表达;Westernblotting法检测转染24h和48h后STAT3、pSTAT3蛋白表达;MTT法检测转染24h、48h、72h后NCI-H460细胞增殖情况。结果显示,SiRNA-ST3载体构建成功。RT-PCR和Westernblotting检测结果表明,NCI-H460细胞转染重组质粒SiRNA-ST3-2和SiRNA-ST3-3后STAT3基因mRNA转录和STAT3、pSTAT3蛋白表达都明显下降(P<0.05)。与未转染组比,SiRNA-ST3-2组和SiRNA-ST3-3组NCI-H460增殖能力24h、48h降低明显(P<0.05);与SiRNA-ST3-N组比,SiRNA-ST3-2组和SiRNA-ST3-3组NCI-H460增殖能力48h降低明显(P<0.05)。由此证实,构建的重组质粒SiRNA-ST3-2、SiRNA-ST3-3能有效靶向沉默STAT3基因,并抑制人大细胞肺癌NCI-H460细胞的增殖能力。 %K RNA干扰 %K 大细胞肺癌 %K STAT3 %K 细胞增殖 %U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract6479.shtml