%0 Journal Article
%T 桔青霉木聚糖酶基因克隆及其在毕赤酵母中的表达及活性分析
%A 田谷
%A 顿宝庆
%A 王智
%A 李维维
%A 许修宏
%A 李桂英
%J 生物技术通报
%P 87-93
%D 2012
%X 通过同源序列PCR克隆的方法,获得桔青霉(Penicilliumcitrinum)CR-2菌株的木聚糖酶编码基因xyl,该基因全长984bp,编码327个氨基酸,无内含子序列,具有完整开放阅读框。其编码的氨基酸序列N端具有一段包含19个氨基酸的信号肽序列,并具有糖基水解酶第10家族(GH10)的保守催化域特征,推测该酶属于第10家族成员。将该基因与毕赤酵母表达载体pPIC9相连接构建重组载体pPIC9-XYL,电击转化至毕赤酵母GS115菌株中。挑选阳性重组子经测序、酶活性以及SDS电泳分析表明,xyl基因成功在毕赤酵母中分泌表达,重组酶活性可达214.15IU/mL。该重组酶最适温度与最适pH分别为50℃和4.5,且具有良好的pH和热稳定性。
%K 桔青霉
%K 木聚糖酶
%K 毕赤酵母
%K 酶学性质
%K 表达
%U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract6482.shtml