%0 Journal Article
%T 人生存素survivin的克隆与分泌表达
%A 代晓华
%A 姜琳琳
%A 程昕
%A 纪庆
%A 朱惠芳
%A 熊冬生
%A 周圆
%J 生物技术通报
%P 89-92
%D 2012
%X 旨在克隆人生存素(survivin)基因,并在原核系统中进行可溶性表达。采用RT-PCR方法从人乳腺癌细胞MCF-7中克隆survivin基因,将其重组到pAYZ表达载体中,构建带有六聚组氨酸纯化标记的人survivin基因原核表达载体pAYZ-survivin,将该载体转化大肠杆菌16C9进行表达。结果表明,成功克隆了survivin基因并构建了重组表达载体。融合蛋白主要以可溶性状态分泌到周质腔内存在。分离提取蛋白,HiTrap金属螯合柱进行亲和层析纯化,并经Westernblot验证了高纯度survivin融合蛋白的表达。
%K 生物医学工程
%K 生存素
%K 分泌表达
%K 大肠杆菌
%K 凋亡
%U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract6450.shtml