%0 Journal Article
%T 南极假丝酵母脂肪酶B(CALB)基因在乳酸乳球菌MG1363中的整合及表达
%A 尹建洪
%A 罗立新
%A 王成
%J 生物技术通报
%P 105-109
%D 2012
%X 根据南极假丝酵母脂肪酶B(CALB)的基因序列将CALB基因进行TA克隆、酶切鉴定及测序后,亚克隆至大肠杆菌-乳酸乳球菌穿梭表达载体pMG36e-NisI中,构建重组表达载体pMG36e-NisI-CALB。设计特异性引物P3和P4,对重组质粒pMG36e-NisI-CALB进行红霉素抗性基因的敲除,以构建食品级表达载体pMG36N-CALB,后再将两种重组质粒分别电转化入乳酸乳球菌MG1363,以Nisin为选择压力,考察CALB在MG1363中的表达情况。结果显示,成功构建了表达载体pMG36e-NisI-CALB及pMG36N-CALB,两株重组菌在含有20IUNisin/mL的培养基中均生长情况良好,遗传性能稳定,且经水解圈鉴定,CALB能够进行活性表达。进一步研究发现,CALB基因整合到乳酸乳球菌MG1363染色体中。
%K 乳酸乳球菌
%K 食品级表达载体
%K CALB
%K 基因敲除
%K 整合
%K 活性测定
%U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract6458.shtml