%0 Journal Article
%T 特异性表达siRNA的新型乙肝核酸药物的研究
%A 杨磊
%A 曹以诚
%A 高强
%A 葛洪
%J 生物技术通报
%P 181-185
%D 2012
%X 旨在研究靶向于HBsAg的肝脏特异性siRNA,实现核酸药物高靶向性、高特异性基因治疗乙肝。通过重组PCR的方法构建靶向于HBsAg的肝脏特异性表达的siRNA的核酸药物。将目标载体转染HepG22.2.15细胞,用ELISA的方法测定转染细胞培养液内HBsAg的含量。PCR鉴定和测序确定重组PAAV-MCS载体PApoE1-ApoE2-hAAT-siHBsAg-U13'Box构建成功。重组质粒对HepG22.2.15细胞分泌的HBsAg所产生的抑制作用自转染后5d达到高峰,抑制率达到(30±0.28)%(P<0.01),siRNA特异性表达单元能显著降低HepG22.2.15细胞HBVDNA的拷贝数。成功构建的肝脏特异性、siRNA高表达的核酸药物可以有效地抑制HBV基因的表达和复制,为乙肝的进一步治疗研究做了关键性工作。
%K RNAi
%K 肝脏特异性siRNA
%K 重组PCR
%K HepG22.2.15细胞
%K ELISA
%U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract4310.shtml