%0 Journal Article
%T HeLa细胞cDNA文库及酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-CPn0308的构建
%A 田颖新
%A 王春苗
%A 刘雪晴
%A 贾晓晖
%A 贾天军
%J 生物技术通报
%P 148-152
%D 2012
%X 旨在利用酵母双杂交系统构建HeLa细胞的cDNA文库,并构建酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-CPn0308。从HeLa细胞中提取总RNA,应用SMARTTM技术,构建以pGADT7-Rec为载体的HeLa细胞酵母GAL4AD融合cDNA文库。应用PCR技术扩增目的片段CPn0308,并成功克隆该基因到诱饵载体pGBKT7中,将重组质粒转化酵母菌株AH109后,检测诱饵载体有无自激活和细胞毒性作用。结果显示,文库展现良好的多态性,重组诱饵载体pGBKT7-CPn0308不具有毒性且未自主激活报告基因,说明该文库和诱饵质粒可用于酵母双杂交系统。
%K HeLa细胞
%K cDNA文库
%K pGBKT7-CPn0308
%K 酵母双杂交
%K 自激活
%U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract6376.shtml