%0 Journal Article %T 受四环素调控的真核表达系统SK-Hep1细胞株的建立 %A 彭晓慧 %A 毛宣 %A 汤顺清 %J 生物技术通报 %P 93-96 %D 2012 %X 建立稳定、高效表达外源基因的SK-Hep1细胞株,以便进一步研究基因的作用。首先将调控质粒pCDNA6/TR转染SK-Hep1细胞,经潮霉素筛选得到多个稳定单克隆。各个单克隆分别扩大培养后,转染pCDNA4/TO/lacZ质粒,再经过DOX(强力霉素)诱导表达,检测β-半乳糖苷酶(β-Dgalaetosidase,β-gal)活性,从而筛选出高诱导水平低背景表达的SK-Hep1tet-on细胞株。最后,再将pCDNA4/TO/c-myc质粒转染进SK-Hep1tet-on细胞株,进一步通过Westernblotting检测该系统对下游基因的表达调控。成功建立了一株受DOX调控的高诱导水平低背景表达的细胞株SK-Hep1tet-on10#。 %K 强力霉素 %K 转染 %K 诱导 %K 表达调控 %K SK-Hep1细胞株 %U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract6333.shtml