%0 Journal Article
%T 红笛鲷T淋巴细胞酪氨酸激酶的原核表达及多克隆抗体制备
%A 黄瑜
%A 张雪利
%A 蔡佳
%A 简纪常
%A 吴灶和
%A 鲁义善
%A 樊云霞
%J 生物技术通报
%P 113-118
%D 2013
%X 为研究红笛鲷（Lutjanussanguineus）T淋巴细胞酪氨酸激酶（Lymphocytecellkinase，LCK）蛋白在机体中的组织分布情况，克隆出红笛鲷lck（LS-lck）基因序列，经酶切、连接等步骤，构建重组质粒pET-28a-LS-LCK，再将其转入大肠杆菌BL21（DE3）菌株后进行IPTG诱导表达。通过表达条件的优化，重组蛋白在37℃、0.03mmol/LIPTG条件下诱导4h后获得最大表达量，且主要以包涵体形式存在。Westernblot检测重组蛋白可与鼠抗His-tag单克隆抗体发生特异性结合，表明为目的蛋白。利用纯化后的rLS-LCK重组蛋白免疫小鼠，获得了1∶40000高效价的抗血清，Westernblot分析显示，融合蛋白能被小鼠的阳性血清识别，说明rLS-LCK融合蛋白具有较好的免疫反应性和免疫原性。
%K 红笛鲷
%K lck
%K 基因
%K 原核表达
%K Westernblot分析
%K 抗原性分析
%U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract10080.shtml