%0 Journal Article
%T β-catenin和突变体ΔN90腺病毒载体的构建及其在MSCs中的表达
%A 崔恒进
%A 王春燕
%A 胡君
%A 谢桂琴
%A 徐晓静
%A 张焕相
%J 生物技术通报
%P 153-158
%D 2013
%X 旨在研究β-catenin对MSCs迁移的作用，构建β-catenin和突变体ΔN90的重组腺病毒载体，在MSCs中验证其表达情况。将目的基因定向克隆到pAdTrack-CMV穿梭载体上，并经PmeⅠ线性化后在BJ5183细菌中与pAdEasy-1骨架质粒同源重组，获得重组腺病毒载体，在QBI-293A细胞中包装和扩增。结果显示，酶切和测序证实Ad-β-catenin和Ad-ΔN90质粒构建正确，荧光显微镜可观察到GFP的表达，并选出150MOI为最适感染MSCs的感染复数，Westernblot检测到Ad-β-catenin和Ad-ΔN90都能增加β-catenin的蛋白表达量，TOPFlash检测到Ad-β-catenin和Ad-ΔN90都能增加β-catenin的转录活性。说明成功构建Ad-β-catenin和Ad-ΔN90腺病毒载体，并获得高滴度病毒子。
%K 腺病毒载体
%K β-catenin
%K ΔN90
%K 骨髓间充质干细胞
%K 构建
%U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract10055.shtml