%0 Journal Article
%T 重组人EGFL6在HEK293细胞中的瞬时表达
%A 亢中奎
%A 张晋霞
%A 姜浩武
%A 王宏
%A 宋其芳
%A 黄建芳
%A 邓宁
%J 生物技术通报
%P 170-176
%D 2013
%X 旨在通过构建EGFL6的真核表达载体，在HEK293T细胞中进行表达，并利用HEK293T细胞表达的EGFL6条件培养基，探讨EGFL6对人黑色素瘤A375细胞和人卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响。利用PCR方法亚克隆得到的EGFL6基因片段及EGFP基因片段，用重叠PCR方法构建成EGFP-EGFL6融合基因片段，并分别将测序正确的EGFP-EGFL6融合基因片段及EGFP基因片段构建到真核表达载体pAAV中。表达载体质粒去内毒素纯化后，瞬时转染HEK293T细胞进行表达，荧光定位分析和Westernblot检测EGFL6的表达。CCK-8试验分析含EGFP-EGFL6融合蛋白的HEK293T条件培养基对A375细胞和SKOV3细胞的增殖能力的影响。结果显示，酶切鉴定pAAV-EGFP-EGFL6和pAAV-EGFP两个重组表达载体均构建成功；EGFP荧光定位及Westernblot结果均显示EGFP-EGFL6在HEK293T细胞中成功表达；增殖抑制试验结果显示EGFL6促进了A375和SKOV3细胞的增殖，对肿瘤细胞的促增殖率分别达到（37.79±14.05）%和（30.53±6.31）%。成功地将EGFP应用于EGFL6真核表达载体的构建与表达，结果表明人EGFL6促进了A375和SKOV3细胞的增殖。
%U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract9996.shtml