%0 Journal Article %T 河鲈RAPD-PCR反应体系的建立与优化及引物筛选 %A 董艳艳 %A 胡文革 %A 路李鹏 %A 陈登稳 %A 杨迪 %A 王艳萍 %A 韩晶 %J 生物技术通报 %P 114-118 %D 2013 %X 以河鲈为研究材料,对河鲈RAPD-PCR的反应体系进行优化和适用引物的筛选,采用正交设计方法,选用L17(54)正交表,以河鲈基因组DNA为模板,对影响PCR反应较大的4个因素:Taq酶、Mg2+、dNTPs、引物在5个水平上进行优化试验,得到河鲈最优RAPD-PCR反应体系:25μL反应体系中含有30ngDNA模板1.5μL,10μmol/L引物0.7μL,10×buffer2.5μL,25μmol/LdNTPs0.4μL,5UTaq酶0.2μL,2.5mmol/LMgCl23.0μL;利用优化体系从50条引物中筛选得到10条适用引物,并确定了引物的最佳退火温度。 %U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract9988.shtml