%0 Journal Article %T 家蝇14-3-3蛋白基因的cDNA克隆与序列分析 %A 国果 %A 吴沁怡 %A 吴建伟 %A 付萍 %A 张勇 %J 生物技术通报 %P 105-109 %D 2013 %X 从家蝇cDNA文库中筛选获得家蝇14-3-3(MD14-3-3)基因DNA序列,以该基因的cDNA文库质粒为模板,PCR方法对MD14-3-3基因进行扩增,以pET28a(+)为载体构建重组质粒。采用生物信息学方法对该基因及其编码蛋白的基本理化性质、疏水性、信号肽、二级结构和亚细胞定位等方面进行预测和分析。结果表明,MD14-3-3基因ORF全长771bp,编码257个氨基酸,理论分子量29.35kD;等电点5.78,属于亲水性的酸性蛋白,含有多种酶的结合位点,有14-3-3家族结构域和活性位点,定位于细胞核中,二级结构以α螺旋和无规则卷曲为主。经PCR、双酶切及NDA测序结果均表明pET28a(+)-MD14-3-3重组质粒构建成功。 %U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract9986.shtml