%0 Journal Article %T 三角帆蚌(Hyriopsiscumingii)Perlucin蛋白原核表达条件的优化及表达产物的鉴定 %A 林静云 %A 白志毅 %A 李家乐 %J 生物技术通报 %P 114-118 %D 2013 %X 采用PCR方法从三角帆蚌外套膜cDNA中扩增perlucin基因的开放阅读框,连接到pET-28a表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达重组融合蛋白pET-28a-Hcperlucin。通过优化培养温度、IPTG浓度以及诱导时间,得出重组融合蛋白的最佳表达条件分别为:37℃、0.1mmol/LIPTG、6h。重组融合蛋白主要以包涵体形式存在。SDS-PAGE和Westernblot分析结果表明,表达重组融合蛋白的相对分子量与预测值相符,约为21kD,并能与鼠抗His-tag单克隆抗体进行特异性结合,表明重组融合蛋白构建成功。 %K 三角帆蚌 %K Perlucin %K 原核表达 %K Western %K blot分析 %U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract9914.shtml