%0 Journal Article %T 小麦h型硫氧还蛋白Trx-h酵母双杂交诱饵载体的构建和自激活检测 %J 河南农业科学 %P 19-22 %D 2014 %X 为构建小麦Trx-h型硫氧还蛋白酵母双杂交诱饵载体,并检测其对酵母细胞的自激活作用。利用RT-PCR扩增TaTrx-h基因的ORF区域,并与pGBKT7载体连接构建诱饵载体pGBKT7-Trx-h,利用PEG/LiAC法转化酵母AH109后,通过表型筛选检测诱饵蛋白对酵母有无自激活作用。结果表明,含pGBKT7-Trx-h质粒的酵母在SD/-Trp-Leu培养基上能正常生长,说明诱饵载体表达产物对酵母细胞无毒性作用;在SD/-Trp-Leu-His-Ade培养基上不能生长,说明诱饵质粒无自主激活报告基因的作用。因此,可以利用该诱饵载体通过酵母双杂交方法筛选与Trx-h蛋白相互作用的蛋白。 %K 小麦 %K 硫氧还蛋白 %K 酵母双杂 %K 诱饵载体 %K 自激活 %U http://www.hnnykx.org.cn/CN/abstract/abstract8.shtml