%0 Journal Article %T 猪伪狂犬病毒野毒株SYBRGreenI实时荧光定量PCR诊断试剂盒的研制 %J 河南农业科学 %P 128-131 %D 2014 %X 根据GenBank中猪伪狂犬病毒(PRV)gE基因序列设计特异性的引物,PCR扩增获得PRVgE基因片段,构建重组质粒pMD–18T–gE,作为阳性标准品。对SYBRGreenI实时荧光定量PCR反应条件进行优化,建立猪PRVSYBRGreenI实时荧光定量PCR诊断方法,研制诊断试剂盒。扩增产物的熔解曲线分析结果显示只出现单特异峰,无引物二聚体,对猪圆环病毒(PCV–2)、猪细小病毒(PPV)、PRV(gE基因缺失株)、猪源E.coli、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)均无阳性信号扩增,且重复性好,灵敏度可达2.3×101拷贝/μL。结果表明,研制的PRV野毒株SYBRGreenI实时荧光定量PCR试剂盒特异灵敏、快速、重复性好,适于伪狂犬病毒临床样品的检测。 %K 猪伪狂犬病毒 %K 野毒株 %K gE基因 %K 荧光定量PCR %K 诊断试剂盒 %U http://www.hnnykx.org.cn/CN/abstract/abstract68.shtml