%0 Journal Article %T 绵羊早孕因子单克隆抗体的制备及鉴定 %A 刘静静 %A 刘月琴 %A 张英杰 %J 河南农业科学 %P 139-142 %D 2015 %X 为制备绵羊早孕因子(EPF)单克隆抗体,以纯化的EPF重组蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,免疫4次后,取小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,采用间接ELISA方法筛选单克隆抗体细胞株,将筛选的细胞株注入小鼠腹腔得到腹水型抗体,用G-sepharose柱亲合层析法对小鼠腹水型抗体进行纯化,应用SDS-PAGE和Westernblot分析抗体纯化后的纯度及特异性。结果显示,细胞融合后得到了1株抗绵羊EPF单克隆抗体的细胞株B4D5,纯化后的腹水型单克隆抗体纯度较高,具有较强的特异性,应用单克隆抗体检测绵羊妊娠准确率为81.3%。表明,制备的绵羊早孕因子单克隆抗体为特异性抗绵羊EPF抗体。 %K 绵羊 %K 早孕因子 %K 单克隆抗体 %K 特异性 %U http://www.hnnykx.org.cn/CN/abstract/abstract800.shtml