%0 Journal Article
%T 稳定表达靶向BVDVshRNA细胞系的建立及其对BVDV复制的影响
%A 范璐
%A 王丽
%A 史西保
%A 樊剑鸣
%A 王爱萍
%A 张改平
%A 收稿日期--
%A 基金项目国家自然科学基金项目
%A 河南省农业科学院自主创新专项基金
%A 作者简介范璐
%A -女
%A 上海崇明人
%A 在读硕士研究生
%A 研究方向动物病毒分子致病机制。
%A E-mail@qq.com
%A ﹡通讯作者张改平
%A -男
%A 河南内黄人
%A 研究员
%A 中国工程院院士
%A 博士
%A 主要从事动物免疫学与动物因病快速诊断研究。E-mailzhanggaiping@yahoo.com.cn
%J 河南农业科学
%P 134-139
%D 2014
%X 为研究靶向牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的shRNA对BVDV复制的影响,利用脂质体介导法将BVDVshRNA真核表达质粒pSGH1-sh1083和pSGH1-sh8235及对照质粒pSGH1转染MDBK细胞,通过G418抗性以及有限稀释法筛选获得BVDVshRNA单克隆细胞系subclonepSGH1-1083和subclonepSGH1-8235及对照细胞系subclonepshmock。通过观察其细胞病变效应(CPE)、测定TCID50及RT-PCR、流式细胞术检测BVDVshRNA细胞系对BVDV复制的影响。结果表明,与阴性对照组相比,单克隆细胞系subclonepSGH1-1083和subclonepSGH1-8235的细胞在感染BVDV72h后CPE不明显,其TCID50低于阴性对照组;RT-PCR结果显示,单克隆细胞系subclonepSGH1-1083和subclonepSGH1-8235的细胞在感染BVDV后病毒E2基因的表达减弱;流式细胞术检测不同细胞系接毒24h后的结合率,单克隆细胞系subclonepSGH1-1083和subclonepSGH1-8235与病毒结合率分别为11.37%和11.51%,与对照组(20.25%)相比有所降低。综上,稳定转染BVDVshRNA的单克隆细胞系subclonepSGH1-1083和subclonepSGH1-8235对BVDV的复制具有抑制作用。
%K RNA干扰
%K 牛病毒性腹泻病毒
%K 短发夹RNA
%K 单克隆细胞系
%K 复制
%U http://www.hnnykx.org.cn/CN/abstract/abstract766.shtml