%0 Journal Article
%T 建立利用萤光素酶快速检测细胞活性的方法
%J 华东师范大学学报(自然科学版)
%D 2012
%X 运用PCR的方法，从萤火虫萤光素酶基因载体pGL4.26扩增萤火虫萤光素酶基因片段，将其插入连接于原核表达载体pET24a中，构建重组表达载体pET24a-Luc.经酶切鉴定及序列分析后，将重组载体转化到表达菌株大肠杆菌BL21（DE3）中，获得阳性重组菌BL21/pET24a-Luc.IPTG诱导蛋白高效表达并通过镍柱亲和层析纯化萤火虫萤光素酶.该目的蛋白活性用Bright-GloTM试剂进行验证并用于建立一种基于测量ATP含量的检测细胞生物活性的方法.与传统的细胞生物活性检测试剂盒MTT，CCK-8以及AlamarBlue比较，该方法具有反应迅速、活力高、灵敏度好、生产方便的优点，具有实际应用的潜力.
%K 萤火虫萤光素酶
%K 蛋白表达
%K 蛋白纯化
%K 细胞活性
%U http://xblk.ecnu.edu.cn/CN/abstract/abstract24769.shtml