%0 Journal Article
%T 热球菌HJ21高温α-淀粉酶基因克隆、表达及性质研究
%A 王淑军
%A 吕明生
%A 秦松
%A 陆兆新
%A 房耀维
%A 邓祥元
%A 林谦
%A 刘红飞
%J 华东政法大学学报
%P 158-164
%D 2011
%X 通过简并引物扩增热球菌(Thermococcussiculi)HJ21高温α-淀粉酶保守区域之间的序列,再利用Site-finding技术获得两端未知序列。构建了在N端添加了His6标签的表达载体pEt-28a-His6-THJA后转化E.coli,在IPTG诱导下表达。进一步纯化后SDS-PAGE电泳检测达到电泳纯,重组酶分子量为50KDa。重组酶最适作用温度和pH值分别为90℃,pH5.0。重组酶在pH为5.5时最稳定;K＋,Sr2＋,Mg2＋,Na＋对α-淀粉酶活力的促进作用不显著,Cu2＋,Pb2＋,Hg2＋,Zn2＋,N-溴代丁酰亚胺和三氯乙酸对该酶有显著抑制作用。
%K 深海古菌
%K 高温酸性α-淀粉酶
%K 基因克隆
%K 表达
%K 酶学性质
%U http://www.hyxb.org.cn/aos/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20110318&flag=1