%0 Journal Article %T 伪狂犬病毒PK/gG/GFP重组转移载体的构建和表达 %J 华南农业大学学报 %D 2003 %R 10.7671/j.issn.1001-411X.2003.04.018 %X 在构建了含伪狂犬病毒(pseudorabiesvirus,PRV)湖北株部分PK基因和gG基因转移载体的基础上,利用平端连接的方法将绿色荧光蛋白(GFP)的基因表达盒插入到缺失的部分,并在下游引入了1个多克隆位点,构建了重组转移载体KGDF。用限制性内切酶鉴定重组转移载体KGDF。根据质粒EGFP-C1中的GFP基因序列设计1对引物鉴定GFP表达盒插入的正确性。用脂质体转染试剂盒将KGDF和PRVFIB的基因组或病毒共转染BHK-21细胞,在荧光显微镜下将出现病变的荧光斑挑出得到重组病毒。将重组病毒扩大培养后提取基因组鉴定重组病毒中的GFP基因,并通过挑取病变的荧光斑的方法纯化重组病毒。 %K 伪狂犬病毒基因转移载体绿色荧光蛋白克隆 %U http://xuebao.scau.edu.cn/zr/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=200304106&flag=1