%0 Journal Article %T 大肠杆菌O157:H7eaeA基因的原核表达 %J 华南农业大学学报 %P 109-113 %D 2007 %R 10.7671/j.issn.1001-411X.2007.01.026 %X 将含广东分离株大肠杆菌O157:H7021210eaeA基因的克隆质粒双酶切后,亚克隆至原核表达载体pET-28a(),经PCR鉴定、酶切鉴定及核苷酸序列测定,正确构建了原核重组表达质粒pET-eaeA.再将该重组质粒转化E.coliBL21(DE3)pLysS,经IPTG诱导,进行SDS-PAGE,结果显示,目的蛋白的相对分子质量约为94000,与eaeA基因蛋白的理论值相符.破菌后电泳证实目的蛋白主要以包涵体形式存在.表达蛋白经初步纯化,3次免疫新西兰兔,获得抗eaeA蛋白的多克隆血清.经琼脂扩散试验和Western-blotting试验,表明该蛋白具有较好的免疫原性和反应原性. %K 大肠杆菌O157:H7 %K eaeA基因 %K 紧密素 %K 原核表达 %K 大肠杆菌 %K eaeA %K 基因蛋白 %K 原核表达 %K Gene %K Expression %K Prokaryotic %K 反应原性 %K 免疫原性 %K 琼脂扩散试验 %K 血清 %K 多克隆 %K 新西兰兔 %K 纯化 %K 表达蛋白 %K 存在 %K 包涵体 %K 电泳 %K 理论值 %K 相对分子质量 %U http://xuebao.scau.edu.cn/zr/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20070128&flag=1