%0 Journal Article %T 农杆菌子房注射法对金钗石斛的活体转化研究 %A 刘其府 %A 董会 %A 曾宋君 %A 陈之林 %A 吴坤林 %A 张建霞 %A 段俊 %J 华南农业大学学报 %P 378-382 %D 2013 %R 10.7671/j.issn.1001-411X.2013.03.019 %X 对金钗石斛Dendrobiumnobile进行人工自花授粉,在授粉之后10、20、30、40、45、50和60d分别将工程化根癌农杆菌AgrobacteriumtumefaciensEHA105(pCAMBIA1301)直接注射入子房内部.150d后,金钗石斛蒴果成熟,摘取果实,进行种子β-葡萄糖苷酸酶(GUS)染色、无菌播种、潮霉素筛选以及PCR检测试验.结果表明:子房注射对果实发育具有较大影响,在授粉后10~30d进行子房注射后,果实脱落;在授粉后45d进行子房注射,成熟果实注射部位的种子GUS染色率最高,可达18%;无菌播种之后,经潮霉素筛选,获得11株幼苗,每株植株均表现出GUS染色反应;随机挑选4株幼苗进行PCR检测,发现均能扩增出预期条带,说明外源基因已经整合到植株基因组内.农杆菌子房注射法在兰科植物转基因的成功应用,可以为兰科植物育种提供一种简单高效的方法. %K 金钗石斛 %K 农杆菌子房注射法 %K GUS组织化学染色 %K 活体转化 %K PCR检测 %U http://xuebao.scau.edu.cn/zr/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=201303019&flag=1