%0 Journal Article
%T 牛白细胞介素-17真核表达载体的构建及在牛乳腺上皮细胞中的表达
%A 王婷
%A 崔新洁
%A 刘秉春
%A 陶琳
%A 胡庆亮
%A 修磊
%A 王潇
%J 华南农业大学学报
%P 79-85
%D 2014
%R 10.7671/j.issn.1001-411X.2014.01.015
%X 【目的】在体外分离培养牛乳腺上皮原代细胞，并构建牛白细胞介素-17(bIL-17)基因真核表达质粒，观察重组质粒在牛乳腺上皮细胞的表达.【方法】提取牛脾脏细胞总RNA，通过RT-PCR扩增bIL-17，将bIL-17连入pMD19-T进行测序，测序成功后将bIL-17插入含有增强型绿色荧光蛋白报告基因的真核表达质粒pEGFP-N3上，构建真核表达质粒pEGFP-N3-bIL-17.用脂质体法将pEGFP-N3-bIL-17质粒转染于牛乳腺上皮细胞，荧光显微镜观察绿色荧光蛋白在细胞中的表达，RT-PCR检测bIL-17基因在细胞内的转录，定量ELISA检测bIL-17蛋白在细胞内的表达情况.【结果和结论】成功构建具有绿色荧光和新霉素抗性的双选择标记的牛白细胞介素-17真核表达载体，并可在牛乳腺上皮细胞成功表达.
%K 牛白细胞介素-17
%K 载体构建
%K 牛乳腺上皮细胞
%K 转染
%K 表达
%U http://xuebao.scau.edu.cn/zr/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=201401015&flag=1