%0 Journal Article %T 基于NBS-LRR类R基因保守结构域克隆瓠瓜抗病基因同源序列 %A 赵芹 %A 谢大森 %A 何晓明 %A 罗少波 %A 彭庆务 %J 华南农业大学学报 %P 92-98 %D 2015 %R 10.7671/j.issn.1001-411X.2015.05.016 %X 【目的】分离鉴定瓠瓜Lagenariasiceraria抗病种质的抗病基因同源序列(Resistancegeneanalogs,RGAs),为瓠瓜功能性抗病基因的克隆及分子标记辅助育种奠定基础.【方法】根据已知核苷酸结合位点和富亮氨酸重复(Nucleotidebindingsiteandleucinerichrepeat,NBS-LRR)类抗病基因保守区设计简并引物,从“大籽瓠”抗性材料基因组DNA中分离抗病基因同源序列,并利用生物信息学软件进行长度变异、保守结构域、同源比对与系统进化分析.【结果和结论】基于同源克隆策略,获得23条瓠瓜NBS抗病同源序列,命名为HNB1~HNB23,GenBank登录号为KJ908192~KJ908214.序列分析及同源比对结果表明,这些RGAs长度变异在242~261nt之间,18条序列具有连续开放阅读框(Openreadingframe,ORF),推导氨基酸序列具有P-loop、Kinase-2a典型NBS类R基因保守结构域;核苷酸序列相似性为41.5%~98.8%,氨基酸序列相似性为21.5%~100.0%;利用NCBIBlast同源搜索发现,与其他植物尤其是冬瓜、黄瓜、葫芦及丝瓜的已知R基因具有40%~100%相似性;氨基酸序列聚类分析将其分为5个组;同源进化分析表明,23条瓠瓜RGAs均为non-TIR-NBS-LRR类R基因,与推导氨基酸序列多重比较结果一致. %K 瓠瓜 %K NBS-LRR类 %K 抗病基因同源序列 %K 简并引物 %K 序列分析 %U http://xuebao.scau.edu.cn/zr/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=201505018&flag=1