%0 Journal Article
%T 金丝桃素合成酶基因的克隆及其表达
%A 王力
%A 张娜
%A 张秀清
%A 孙君社
%J 华北农学报
%P 1-3
%D 2005
%R 10.3321/j.issn:1000-7091.2005.04.001
%X 自然条件下金丝桃素在植物中的含量较低且不稳定，提取工艺受其他物质的影响较大，在一定程度上限制了金丝桃素在医药、食品等领域的应用。为了研究金丝桃素合成途径并实现其体外转化，以贯叶连翘愈伤组织总RNA为模板，经RT-PCR扩增得到了编码金丝桃素合成酶的全长cDNA，即Hyp基因。将该基因克隆到原核表达载体pET30a中，成功构建金丝桃素合成酶表达载体pET30a-Hyp，并转化到大肠杆菌BL21（DE3）中。含有重组质粒的克隆在IPTG诱导下，表达出金丝桃素合成酶融合蛋白，利用Ni柱纯化菌体裂解上清中表达的融合蛋白，对纯化产物进行SDS_PAGE分析，结果Hyp基因得到了高效表达，大小约为20kD。
%K 金丝桃素
%K 贯叶连翘
%K 金丝桃素合成酶
%U http://www.hbnxb.net/CN/abstract/abstract3720.shtml