%0 Journal Article
%T 鸡α干扰素基因的克隆、原核表达及抗病毒活性测定
%A 陈红英
%A 宋凌云
%A 崔保安
%A 胡功政
%A 贾艳艳
%A 郭显坡
%J 华北农学报
%P 40-43
%D 2009
%R 10.7668/hbnxb.2009.01.010
%X 通过PCR技术从罗曼鸡肝脏基因组中扩增鸡α干扰素(ChIFN-α)全基因,并克隆和测序。序列分析表明,ChIFN-α基因全长为582bp,亚克隆其成熟蛋白编码基因489bp,利用基因重组技术构建了重组质粒,使ChIFN-α置于原核表达载体pQE30的T5启动子下并同6×His(多聚组氨酸标签)-Tag融合。经酶切和PCR鉴定,DNA测序证实重组质粒pQEChIFN-α构建正确将pQEChIFN-α转化大肠杆菌M15感受态细胞,用IPTG诱导表达。SDS-PAGE和Westernblot证实表达出分子质量为19.80kDa的融合蛋白。表达的蛋白以包涵体形式存在,经变性、复性处理后,在Vero细胞上抗水泡性口炎病毒的活性为1.16×103U/mg。本研究成功表达了ChIFN-α,表达的重组蛋白具有一定的生物活性。
%K 鸡
%K &alpha
%K 干扰素
%K 克隆
%K 原核表达
%K 抗病毒活性
%U http://www.hbnxb.net/CN/abstract/abstract6969.shtml