%0 Journal Article
%T 单核细胞增生李斯特菌sRNA伴侣分子hfq的基因克隆、表达及纯化
%A 彭叶龙
%A 乔军
%A 孟庆玲
%A 谢堃
%A 陈诚
%A 刘田莉
%A 马玉
%A 才学鹏
%A 陈创夫
%J 华北农学报
%P 80-87
%D 2014
%R 10.7668/hbnxb.2014.05.014
%X 为克隆、表达单核细胞增生李斯特菌sRNA分子伴侣蛋白hfq基因,并纯化重组蛋白,通过PCR的方法从单核细胞增生李斯特菌基因组DNA中扩增出hfq基因,将扩增产物克隆于pMD18-T载体中,测序验证后,再将hfq基因亚克隆至表达载体pET-32a(+)中,成功构建pET-32a(+)-hfq原核表达载体。然后,转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,通过IPTG进行诱导表达,对表达蛋白进行可溶性分析,并采用Ni-NTA纯化目的蛋白。结果显示:克隆的hfq基因全长234bp,编码77个氨基酸,通过SDS-PAGE可以检测到27kDa的蛋白特异性条带;并从上清中纯化得到了Hfq融合蛋白。为进一步研究该蛋白的生物学功能奠定了基础。
%K 单核细胞增生李斯特菌
%K hfq基因
%K sRNA伴侣分子
%K 克隆
%K 表达
%K 纯化
%U http://www.hbnxb.net/CN/abstract/abstract6885.shtml