%0 Journal Article
%T 携带双串联卵清蛋白T细胞表位的嵌合兔出血症病毒衣壳蛋白自聚能力的研究
%A 张燕
%A 胡波
%A 宋艳华
%A 范志宇
%A 魏后军
%A 姜平
%A 王芳
%J 华北农学报
%P 55-61
%D 2014
%R 10.7668/hbnxb.2014.01.011
%X 以兔出血症病毒(RHDV)衣壳蛋白VP60为载体,构建VP60携带双串联OVAT细胞表位(Ovalbumin,卵清蛋白第257~264位氨基酸)的嵌合蛋白,研究外源基因对VP60蛋白表达及病毒样颗粒(VLPs)装配的影响,分析VP60作为载体对外源基因长度的耐受性。运用基因克隆和重组技术,通过2次SOE法(Splicingbyoverlapextension,重叠延伸剪接术),将双串联OVAT细胞表位(257~264位氨基酸)的基因序列取代VP60第302~309位氨基酸的基因序列,得到嵌合VP60基因。利用杆状病毒表达系统表达嵌合蛋白,命名为DC。经IFA、SDS-PAGE、WesternBlot、RT-PCR方法鉴定嵌合蛋白的表达,并通过电镜观察嵌合蛋白自聚为病毒样颗粒的能力。嵌合VP60蛋白在杆状病毒表达系统中得到高效表达,且可自聚形成病毒样颗粒。携带双串联外源表位的嵌合VP60蛋白得到有效表达,并可形成VLPs。该研究为嵌合VP60VLPs的形成、结构功能的研究奠定基础,同时扩展了VP60作为载体可携带的外源基因耐受性的研究资料。
%K 兔出血症病毒
%K VP60
%K 双串联OVAT细胞表位
%K 病毒样颗粒
%U http://www.hbnxb.net/CN/abstract/abstract8172.shtml