%0 Journal Article
%T 拟南芥Alpha-dioxygenase1的原核表达、纯化及活性的检测
%A 张小梅
%A 韩念法
%A 张美祥
%A 李广录
%A 范三红
%A 郭蔼光
%J 华北农学报
%P 9-12
%D 2008
%R 10.7668/hbnxb.2008.03.003
%X 从经水杨酸处理的拟南芥开花期植株中获得cDNA,扩增得到Alpha-dioxygenase1(DOX1)基因,进行原核表达、纯化和生物活性检测。利用原核表达载体pMAL-c4x在T7ExpressCompetentE.coli和BL21(DE3)-RIPLcodon+菌株中表达DOX1,经AmyloseResin亲和层析柱纯化。SDS-PAGE结果表明,重组融合蛋白在BL21(DE3)-RIPLcodon+中的表达通过灰度值比较分析以可溶性为主,表达率约3.7%,纯化的DOX1纯度可达45%。愈创木酚法表明,可溶性重组蛋白不具有过氧化物酶活性;2,4-DNP法测试表明可溶性重组蛋白具有脂肪酸双加氧酶活性。
%K Alpha-dioxygenase1
%K 重组表达
%K 2
%K 4-DNP
%K 亲和纯化
%K 活性
%U http://www.hbnxb.net/CN/abstract/abstract2436.shtml