%0 Journal Article
%T 正交设计优化大豆SSR-PCR反应体系及引物筛选
%A 苏辉
%A 李志刚
%A 宋书宏
%J 华北农学报
%P 99-102
%D 2009
%R 10.7668/hbnxb.2009.02.021
%X 以大豆(GlycinemaxL.)为材料,研究了PCR反应体系的主要成分对大豆SSR扩增结果的影响,并确定影响SSR扩增结果的各因素的最佳用量.以CTAB法提取的大豆叶片DNA为模板,应用L16(44)正交设计对影响大豆SSR-PCR的主要参数进行优化,建立适合大豆SSR-PCR反应的最佳体系.结果表明:各因素不同水平浓度对PCR反应结果均有显著影响.大豆SSR-PCR优化反应体系为:2.0μL10×PCRBuffer,30ng模板DNA,150μmol/LdNTP,0.μmol/LSSR引物,1.5UTaqDNA聚合酶,2.0mmoL/LMg2+,加ddH2O至终体积20.0μL.优化的PCR扩增程序为:9℃预变性5min.9℃变性30s,50℃退火1min,72℃延伸1min,共35个循环,72℃延伸5min,℃保存.同时选用200对大豆引物对2份材料进行扩增,筛选出条带清晰,多态性好的引物7对,用于大豆SSR标记的进一步研究.
%K 大豆
%K SSR-PCR
%K 正交设计
%K 体系优化
%K 引物筛选
%U http://www.hbnxb.net/CN/abstract/abstract1386.shtml