%0 Journal Article
%T 内蒙古羊源细粒棘球蚴Eg95基因原核表达及蛋白鉴定
%A 李志伟
%A 王志钢
%A 湛奎
%A 陈献威
%A 杨军
%A 李洁
%J 华北农学报
%P 57-60
%D 2010
%R 10.7668/hbnxb.2010.04.012
%X 在克隆内蒙古羊源细粒棘球蚴疫苗候选基因Eg95的基础上,构建原核表达载体pET-Eg95并转化E.coliBL21(DE3),优化表达体系,获得Eg95纯化蛋白.将Eg95基因从克隆质粒pMD19-T-Eg95亚克隆到原核表达载体pETa(+)上,构建原核表达载体pET-Eg95,转化E.coliBL21(DE3)诱导表达,优化表达条件.纯化的Eg95融合蛋白经SDS-PAGE和WesternBlot鉴定其正确性和免疫学活性.原核表达载体pET-Eg95在大肠杆菌中高效表达,优化的原核表达条件为:当菌液OD600值为0.6时,加入终浓度为0.1mmol/L的IPTG,37℃,振荡培养5h.纯化后的蛋白经SDS-PAGE和Westernblot鉴定为目的蛋白并具有生物学活性.原核表达载体pET-Eg95构建正确并可高效表达可溶性Nus-Eg95融合蛋白,可作为特异性抗原应用于免疫印迹法检测血清抗体.
%K 细粒棘球蚴
%K Eg95
%K 原核表达
%K 蛋白纯化
%K 生物活性
%U http://www.hbnxb.net/CN/abstract/abstract2021.shtml