%0 Journal Article %T 棉花肉桂醇脱氢酶基因的克隆与分析 %A 倪志勇 %A 李波 %A 吕萌 %A 王娟 %A 白岩 %A 范玲 %J 华北农学报 %P 23-29 %D 2010 %R 10.7668/hbnxb.2010.02.005 %X 肉桂醇脱氢酶(CAD)是木质素生物合成过程中的一个关键酶类。根据棉花纤维特异表达cDNA文库分析得到的肉桂醇脱氢酶基因EST序列设计引物,采用RT-PCR技术从棉花中克隆了一个CAD基因,命名为GhCAD5(GenBank登录号为FJ848868)。研究结果表明:GhCAD5全长1488bp,具有一个1068bp的开放阅读框,5′非编码区为140bp,3′非编码区为280bp,编码355个氨基酸,预测分子量约为38.403kDa,等电点为7.67。氨基酸同源性分析发现,GhCAD5与拟南芥AtCAD1和水稻OsCAD4的同源性较高。利用PCR方法克隆了GhCAD5基因的基因组序列,长度为1695bp,包含6个外显子和5个内含子。将GhCAD5的ORF连接于原核表达载体pET-28a中,经IPTG诱导,获得了相应蛋白的表达。棉花GhCAD5基因的克隆为进一步研究其生物学功能和应用奠定了基础。 %K 棉花 %K 肉桂醇脱氢酶 %K 基因克隆 %K 原核表达 %U http://www.hbnxb.net/CN/abstract/abstract1825.shtml