%0 Journal Article %T 携带结核杆菌Ag85B基因的植物表达载体的构建及鉴定 %A 李君武 %A 刘艳 %A 黄清华 %A 叶秋萍 %J 华北农学报 %P 1-4 %D 2010 %R 10.7668/hbnxb.2010.02.001 %X 构建包含结核杆菌Ag85B基因的植物表达载体,并转化农杆菌LBA4404。以pcDNA3-Ag85B为模板,通过常规PCR克隆出Ag85B基因,定向克隆至含有玉米特异性启动子globulin-1的pCR2.1载体上,然后将globulin-1-Ag85B的融合片段酶切下来,并连接到经过加工修饰的含有抗除草剂基因bar的双元表达载体pCAMBIA1300上,将重组质粒转化至农杆菌LBA4404中。重组质粒双酶切可见0.8bp和10kb的两条特异性条带,与预期大小相一致。重组质粒测序表明克隆的Ag85B基因序列与Genbank上相一致,酶切从农杆菌中所抽提的质粒,片段大小与预期相一致。成功构建与转化了携带结核Ag85B基因的植物双元表达载体,为利用植物反应器生产口服结核疫苗奠定基础。 %K 结核分枝杆菌 %K Ag85B基因 %K globulin-1 %U http://www.hbnxb.net/CN/abstract/abstract1817.shtml