%0 Journal Article %T 呼和浩特市区牛种布鲁菌bp26和omp10的克隆 %A 王军 %A 王瑞 %A 杨莲茹 %A 郭志亮 %A 于翠玲 %A 申之义 %J 华北农学报 %P 70-75 %D 2011 %R 10.7668/hbnxb.2011.02.016 %X 为明确试验布鲁菌和参考布鲁菌菌株与基因库中布鲁菌外膜蛋白BP2和OMP10基因间的同源性.利用布鲁菌外膜蛋白bp2和omp10基因,针对试验布鲁菌和参考布鲁菌菌株进行克隆和序列分析.根据GenBank发表的布鲁菌bp2基因和omp10基因,分别设计合成一对特异性引物,以提取的试验布鲁菌和2株参考布鲁菌的总DNA为模板,通过聚合酶链式反应(PCR)技术扩增得到bp2和omp10基因,回收纯化后将这两个基因分别连接到pMD18-T载体上,热激发转化受体菌大肠杆菌DH5a,质粒提取、PCR鉴定、测序.结果表明,bp2全长为995bp,包含一个由753bp组成的完整开放阅读框,试验菌株的同源性为100%,与参考菌株M5、S2的同源性分别为100%和99.9%,与参考序列S19、870的同源性分别为99.9%和100%.omp10全长531bp,包含一个由39bp组成的完整开放阅读框,试验菌株的同源性为100%,与参考菌株M5、S2的同源性均分别为100%,与参考序列544的同源性分别为99.7%.证实bp2基因和omp10基因在各种型间的同源性都在99%以上,表明这两个基因在布鲁菌属是高度保守的. %K 布鲁菌 %K bp2 %K omp10 %K 同源 %K 分析 %U http://www.hbnxb.net/CN/abstract/abstract2582.shtml