%0 Journal Article
%T 苋菜AmPCS基因的克隆及表达载体构建
%A 孙静文
%A 程明芳
%A 梁国庆
%A 王秀斌
%A 周卫
%J 华北农学报
%P 44-49
%D 2012
%R 10.3969/j.issn.1000-7091.2012.02.009
%X 合成植物络合素(PCs)是高等植物减轻重金属毒害的重要机制。通过对镉超积累苋菜品种天星米植物络合素合成酶基因(PCS)的克隆及表达载体构建,旨在为植物修复镉污染土壤奠定基础。依据同源克隆原理,通过RT-PCR和RACE方法克隆苋菜PCS基因。序列分析表明:苋菜PCS基因cDNA全长1770bp,包含完整的阅读框,编码485个氨基酸;苋菜PCs合成酶与拟南芥、遏蓝菜、芥菜及油菜PCs合成酶相似性为91.96%～95.67%,其氨基酸序列N端有1个Pfam:Phytochelatin结构域(功能为催化合成植物络合素)、C端有1个Pfam:Phytochelatin_C结构域(功能为重金属离子感应器)。因此,推断苋菜PCS基因编码蛋白是PCS-like家族的新成员,具有催化合成植物络合素的功能,将它在GenBank注册,序列号为:JN979370,命名为AmPCS。在AmPCS基因的编码区加入BamHI和SacI酶切位点,双酶切植物表达载体pBI-121和带有酶切位点的PCR产物,成功获得苋菜PCS基因正义表达载体pBI-PCS。
%K 苋菜
%K 植物络合素
%K 克隆
%K AmPCS基因
%K 植物表达载体
%U http://www.hbnxb.net/CN/abstract/abstract1928.shtml