%0 Journal Article
%T 猪流行性腹泻病毒N重组表达蛋白间接ELISA检测方法建立
%A 顾昀
%A 周晓丽
%A 袁秀芳
%A 杜晓莉
%A 徐丽华
%A 李军星
%A 方维焕
%A 王一成
%J 华北农学报
%P 123-129
%D 2015
%R 10.7668/hbnxb.2015.01.020
%X 为了检测猪血清中猪流行性腹泻病毒抗体水平,用纯化的猪流行性腹泻病毒N基因重组表达蛋白作为包被抗原,建立了检测猪流行性腹泻病毒抗体的间接ELISA方法。ELISA的最佳工作条件是:抗原包被浓度为0.5μg/mL,包被时间4℃过夜,5%脱脂乳的PBS封闭37℃2h及4℃过夜。血清稀释度为1:100;37℃作用45min,辣根过氧化物酶标记兔抗猪IgG稀释度为1:10000,37℃温育60min,底物显色37℃15min。抗体临界值为OD450nm≥0.30判为阳性,OD450nm≤0.27判为阴性,介于二者之间判为可疑。经重复性试验和交叉试验,结果表明,该方法特异性强、灵敏度高、重复性好。用已建立的ELISA方法检测临床血清样本184份,总阳性率为68.5%。
%K 猪流行性腹泻病毒
%K 重组N蛋白
%K ELISA
%U http://www.hbnxb.net/CN/abstract/abstract8377.shtml