%0 Journal Article
%T Hath1基因真核表达载体的构建及其在SH-SY5Y细胞中的表达
%A 宋丽华
%A 齐 力
%A 王 敏
%A 迟玉涛
%A 许小敏
%J 吉林大学学报(医学版)
%P 759-762
%D 2013
%R 10.7694/jldxyxb20130424
%X 目的：构建携带Hath1基因的真核表达载体并转染神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y），观察其在SH-SY5Y细胞中的表达。方法：从人全血中提取DNA，克隆Hath1基因，同时扩增色荧光蛋白（GFP）gfp基因；利用引物GFP-R和Hath1-F扩增融合基因gfp-Hath1，克隆至pMD18-T中；经XhoⅠ和EcoRⅠ限制性内切酶酶切，构建重组表达质粒pCDNA3.1(+)::gfp-Hath1；转染SH-SY5Y细胞。结果：PCR扩增，融合基因gfp-Hath1扩增条带大小为2023bp,表明成功扩增gfp-Hath1融合基因。经双酶切鉴定，成功构建真核表达质粒pCDNA3.1(+)::gfp-Hath1。采用间接免疫荧光技术在荧光显微镜下观察到5H-SY5Y细胞中有GFP表达。结论：本研究成功地使Hath1基因在SH-SY5Y细胞中得到表达，为转染耳蜗组织的实验及探索治疗耳聋新方法奠定基础。
%K Hath1基因
%K gfp基因
%K 真核表达
%K 荧光显微镜
%U http://xuebao.jlu.edu.cn/yxb/CN/abstract/abstract4530.shtml