%0 Journal Article %T 大鼠肾小管上皮细胞的分离鉴定及其增殖活力分析 %A 刘朋飞 %A 黄秀英 %A 董 超 %A 冯业童 %A 吴昊昱 %A 刘 迪 %A 吴 璇 %A 周余来 %A 孙 波 %J 吉林大学学报(医学版) %P 74-77 %D 2013 %X 目的:建立一种大鼠肾小管上皮细胞的分离鉴定方法,分析所获得细胞的增殖活力,为肾损伤等肾脏疾病的体外分析实验提供理论基础和技术支持。方法:采用Ⅱ型胶原酶消化法分离肾小管节段,并用Percoll密度梯度离心法进一步纯化肾小管,常规条件下对肾小管节段进行贴壁培养,待细胞爬出后,用免疫组织化学方法检测细胞角质素-18(CK-18)的表达情况,采用流式细胞术对第0、1和2(P0、P1、P2)代细胞的CK-18表达情况进行分析,用CCK-8方法检测各代细胞的增殖活力。结果:肾小管节段培养24h后,可见细胞从节段内爬出;培养72h后,细胞呈铺路石样密集生长。随着传代进行,P0、P1和P2代细胞CK-18的表达效率分别为95.9%、91.5%和76.8%,肾小管上皮细胞逐渐死亡,P2代细胞较P1代细胞增殖活力明显减弱(P<0.05),同时培养体系中杂细胞增多。结论:该方法经济可靠、简便易行,但是所分离的肾小管上皮细胞只可在体外传代2次,不能长期培养,仅P0、P1代细胞可供体外分析实验使用。 %K 肾小管上皮细胞 %K 分离 %K 鉴定 %K 增殖活力 %K 肾小管上皮细胞 %K 分离 %K 鉴定 %K 增殖活力 %U http://xuebao.jlu.edu.cn/yxb/CN/abstract/abstract4375.shtml