%0 Journal Article %T 抗噬菌体甲型副伤寒沙门菌突变菌的构建及其生物学特性 %A 毛普加 %A 冯梦蝶 %A 洪愉 %A 毛小萍 %A 许泽仰 %A 赵继华 %A 杨洪文 %A 宋武战 %A 黄芬 %A 井申荣 %A 曾韦锟 %J 吉林大学学报(医学版) %P 275-281 %D 2015 %R 10.13481/j.1671-587x.20150213 %X 目的:采用同源重组基因敲除方法构建3株甲型副伤寒沙门菌(副甲)抗噬菌体突变菌,并研究其生物学特性。方法:通过PCR和融合PCR方法获得了2、3、5号同源臂片段,经酶切后与pYG4载体连接,构建pYG4-2、pYG4-3和pYG4-5同源重组质粒。经PCR测序鉴定正确后,与野生型副甲菌进行同源重组,获得2、3、5号3株抗噬菌体突变菌。将3株突变菌和野生型副甲菌经不同种类和浓度的抗生素、不同pH值和温度及不同浓度的盐离子处理后,测量菌株的A595值,分析3株突变菌对抗生素、温度、pH值和盐离子的敏感性以及生长曲线。结果:PCR和融合PCR扩增出3个同源臂,构建的pYG4-2、pYG4-3和pYG4-5同源重组质粒经PCR测序表明构建成功;同源重组和抗噬菌体验证表明成功获得3株抗噬菌体突变菌。3株突变菌产生了卡那霉素抗性,且对链霉素表现出敏感性;2号菌表现出氨苄青霉素抗性,5号菌表现高温度耐受性;与野性型副甲菌比较,3株突变菌的生长曲线明显平缓,尤以2号突变菌最为突出。结论:成功构建抗噬菌体突变菌,并获得一些特殊的生物学特性。 %K 甲型副伤寒沙门菌 %K 突变菌 %K 同源重组 %K 生物学特性 %K 噬菌体抗性 %U http://xuebao.jlu.edu.cn/yxb/CN/abstract/abstract4968.shtml