%0 Journal Article
%T 蛋白激酶Pkmyt1对小鼠1-细胞期受精卵发育的抑制作用
%A 刘超
%A 孟智超
%A 任丽莉
%A 刘乙蒙
%A 郭淼
%A 孙弋雅
%A 肖建英
%J 吉林大学学报(医学版)
%P 16-20
%D 2015
%R 10.13481/j.1671-587x.20150104
%X 目的:通过在小鼠1-细胞期受精卵内过表达Pkmyt1-wildtype(WT)(野生型)mRNAs,研究蛋白激酶Pkmyt1对小鼠受精卵早期发育的影响,为进一步阐明Pkmyt1对哺乳动物受精卵早期发育调控的机制奠定基础。方法:构建pcDNA3.1/myc-Pkmyt1-WT质粒。超排卵方法获得小鼠1-细胞期受精卵,实验分为未注射组、TE缓冲液注射组和Pkmyt1-WTmRNAs注射组,收集各组卵细胞后采用Westernblotting法检测Pkmyt1蛋白表达和Cdc2-pTyr15磷酸化状态;相差显微镜观察受精卵的形态变化并计数卵裂率。结果:pcDNA3.1/myc-Pkmyt1-WT质粒构建成功。与未注射组(0.414±0.016)和TE缓冲液注射组(0.441±0.013)比较,受精卵显微注射Pkmyt1-WTmRNAs4h后,Pkmyt1蛋白表达水平(1.112±0.025)增高(P<0.01)。与未注射组(60.81%±3.27%)和TE缓冲液注射组(61.79%±4.08%)比较,Pkmyt1-WT-mRNA注射组卵裂率(34.2%±3.25%)显著降低(P<0.01)。Pkmyt1-WTmRNA注射组在注射hCG后29.0h检测到微弱的磷酸化信号,29.5h检测不到任何磷酸化信号。结论:Pkmyt1过表达后磷酸化Cdc2-pTyr15可抑制小鼠1-细胞期受精卵的卵裂率,提示Pkmyt1负调控小鼠受精卵有丝分裂的进程。
%K 蛋白激酶Pkmyt1
%K 蛋白激酶Wee1
%K 有丝分裂
%K 小鼠受精卵
%U http://xuebao.jlu.edu.cn/yxb/CN/abstract/abstract4919.shtml