%0 Journal Article %T 稳定高表达ANO1对Hep-2细胞生物学性状的影响 %A 李雅冬 %A 张劲松 %A 杨凯 %A 张福军 %A 陈睿 %A 洪苏玲 %J 吉林大学学报(医学版) %P 952-956 %D 2012 %X [摘要]目的:建立外源性ANO1稳定高表达的Hep-2细胞株,并观察其对Hep-2细胞生物学性状的影响。方法:设计引物,提取头颈鳞癌患者的临床标本DNA,并以其为模板行PCR,得到ANO1基因序列片段,将ANO1片段插入到PSG-5质粒,转染入Hep-2细胞株,将稳定高表达ANO1的Hep-2细胞株设为实验组,空白质粒转染的Hep-2细胞株设为对照组。并利用Westernblotting法和免疫荧光实验检测已转染细胞,观察ANO1的表达情况。利用Boyden小室侵袭实验和黏附实验检测Hep-2细胞生物学性状的变化。结果:成功构建含ANO1片段的pSG-5质粒,Westernblotting法检测结果显示,各组均出现目的条带,实验组的相对分子质量为100000处条带明显较浓。间接免疫荧光实验结果显示,稳定高表达ANO1的Hep-2细胞内显现出亮绿色荧光,而空白质粒转染的Hep-2细胞内仅有较暗、较浅的绿色荧光。Boyden小室侵袭实验和黏附实验结果显示,稳定高表达ANO1的Hep-2细胞穿膜细胞百分比和黏附细胞百分比均明显高于对照组,两组结果比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:成功建立了ANO1稳定高表达的Hep-2细胞株,稳定高表达ANO1提高了Hep-2细胞的迁移能力。 %K 头颈部肿瘤 %K ANO1 %K Hep-2细胞 %K 头颈部肿瘤 %K ANO1 %K Hep-2细胞 %U http://xuebao.jlu.edu.cn/yxb/CN/abstract/abstract4290.shtml