%0 Journal Article
%T 携带CML28基因的2型重组腺相关病毒的构建及体外转染树突状细胞
%A 解丽华
%A 冼韵仪
%A 谢雍
%A 谢毅
%J 复旦学报(医学版)
%P 574-580
%D 2009
%X 目的构建携带肿瘤抗原CML28基因的2型重组腺相关病毒（recombinantadeno-associatedvirus，rAAV2/CML28），检测其体外转染人树突状细胞（dendriticcells，DCs）后对DCs的影响和目的基因CML28的表达。方法将CML28基因克隆到2型重组腺相关病毒载体系统（AAVHelper-FreeSystem）中的真核表达质粒pAAV-IRES-hrGFP，将酶切和DNA测序鉴定后的重组表达质粒pAAV-CML28-hrGFP与AAVHelper-FreeSystem中的病毒包装辅助质粒pAAV-RC和pHelper以磷酸钙法共转染AAV-293细胞，制备携带CML28基因的重组腺相关病毒rAAV2/CML28。rAAV2/CML28转染体外培养的DCs，RT-PCR法检测CML28的表达，流式细胞术检测DCs的表面分子和rAAV2/CML28转染DCs的效率。结果流式细胞术证实构建并包装了rAAV2/CML28，该病毒对DCs的转染效率接近30%，病毒转染DCs检测到CML28的表达以及高水平的HLA-DR、CD80、CD83和CD86表达。结论成功构建了携带CML28基因的重组腺相关病毒rAAV2/CML28，该病毒介导目的基因在DCs内表达，DCs的成熟没有因病毒转染受到不良影响，为应用CML28转基因DCs诱导CML28特异性抗肿瘤免疫研究奠定了基础。
%K 2型重组腺相关病毒
%K CML28基因
%K 树突状细胞
%K 肿瘤免疫
%U http://jms.fudan.edu.cn/CN/abstract/abstract120.shtml