%0 Journal Article %T Apelin通过Akt/eNOS机制促进肺血管内皮细胞一氧化氮释放 %A 吴德华 %A 姜祯 %A 缪长虹 %A 陈瑞珍 %J 复旦学报(医学版) %P 57-60 %D 2009 %X 目的探讨Apelin对肺血管内皮细胞释放一氧化氮(NO)的影响及其机制。方法培养新生鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)。(1)以1x105个/孔密度接种至24孔板,80%融合后,无血清培养24h。分为2组:Apelin组,加入Apelin至终浓度为10-8mol/L;对照组,加入等量无血清DMEM培养液。每组设立4个复孔。继续培养,并分别在0min、2min、5min、15min、30min时间点取培养液测NO浓度。(2)以5x105个/孔密度接种至6孔板,80%融合后,无血清培养24h分为3组:Apelin组,加入Apelin至终浓度为10-8mol/L。Apelin+Akt抑制剂(Aktinhibitor)组,加入Apelin前用5μmol/L浓度的Akt抑制剂预处理30min。对照组加入等量DMEM培液。每组设立3复孔。继续培养5min后立即提取总蛋白,用于Westernblot检测磷酸化Akt和磷酸化内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白表达。结果与0min时间点比较,培养液中NO浓度分别在2min、5min、15min时间点增加(PPPP %K Apelin %K 内皮 %K 肺 %K 一氧化氮 %K 内皮源性一氧化氮合酶 %K Akt %K 磷酸化 %K Akt抑制剂 %U http://jms.fudan.edu.cn/CN/abstract/abstract386.shtml