%0 Journal Article %T RNAi沉默Polo-likekinase-1基因表达对大肠癌细胞端粒酶活性的影响 %A 倪国华 %A 范钰 %A 陈坚 %A 钱立平 %A 林庚金 %A 陈功星 %A 丁佳逸 %A 郑树 %J 复旦学报(医学版) %P 14-18 %D 2009 %X 目的探讨polo-likekinase-1(PLK1)基因对大肠癌细胞增殖和端粒酶活性的影响。方法根据PLK1基因序列特点,设计并用化学方法合成小干扰核糖核酸分子(smallinterferingRNA,siRNA),转染人大肠癌SW480细胞后,分别采用实时定量PCR和Westernblot检测PLK1基因mRNA和蛋白表达水平。分别采用MTT法和TRAP-ELISA方法检测PLK1基因转染对大肠癌细胞增殖和端粒酶活性的影响。结果所设计的5个siRNA均能明显抑制大肠癌SW480细胞PLK1mRNA水平,以P4效果最好。以P4转染处理大肠癌细胞后,PLK1mRNA水平和蛋白水平明显下调,且呈浓度和时间依赖性。MTT和TRAP-ELISA方法检测发现,P4siRNA转染组细胞增殖和端粒酶活性明显受到抑制,且呈浓度和时间依赖性(P<0.05,P<0.05)。结论PLK1基因对大肠癌细胞增殖具有重要的调控作用,以PLK1siRNA转染处理大肠癌细胞,可明显抑制大肠癌细胞的恶性增殖,其机制可能与抑制端粒酶活性有关。 %K 大肠肿瘤 %K polo-likekinase-1 %K RNA干扰 %K 小干扰RNA %K 端粒酶 %U http://jms.fudan.edu.cn/CN/abstract/abstract384.shtml