%0 Journal Article
%T 鼠源性NAA10单克隆抗体C7,3A9,5E3的制备与初步鉴定
%A 李建宁
%A 张鸣号
%A 温静
%J 宁夏医科大学学报
%P 1341-1345
%D 2014
%X 目的制备乙酰基转移酶NAA10单克隆抗体并进行初步鉴定。方法利用PCR扩增技术由结肠癌细胞株HT-29中克隆出NAA10全长cDNA。将上述cDNA与原核表达载体pGEX-4T1重组,并将重组体转化大肠杆菌BL-21(DE3),随后行融合蛋白GST-NAA10的表诱导达,用GlutathioneSepharose4B进行纯化。用纯化的GST-NAA10融合蛋白背部皮下多点注射免疫Balb/c小鼠,通过杂交瘤技术制备抗Naa10的单克隆抗体;随后利用ELISA鉴定其效价,Westernblotting鉴定特异性。结果本研究获得只与NAA10特异反应的单抗3株(C7、3A9和5E3),初步确定C7为IgM型,5E3为IgG2a型,3A9为IgM型;单抗C7、5E3针对NAA10具有较高特异性,而3A9特异性相对较差。结论稳定表达的NAA10单克隆抗体细胞株建立成功。
%K NAA10
%K 单克隆抗体
%K 制备
%K 鉴定
%U http://xbonline.nxmu.edu.cn/oa/DArticle.aspx?type=view&id=201412010