%0 Journal Article
%T 人FcγRIIb胞外区原核表达载体的构建及表达
%A 张雷
%A 曹秀琴
%A 杨志伟
%J 宁夏医科大学学报
%D 2011
%X 目的构建人FcγRIIb胞外区蛋白原核表达载体pET-sFcγRIIb,诱导表达并纯化。方法PCR扩增获得人sFcγRIIb基因,并将其定向克隆至原核表达载体pET-32a(+),构建原核表达重组质粒pET-sFcγRIIb,经PCR、限制性内切酶鉴定及测序分析后,转化大肠杆菌BL21,采用不同温度和时间的IPTG诱导蛋白表达,确定最佳诱导条件,SDS―PAGE分析正确后,用镍琼脂糖磁珠纯化。结果扩增出了人sFcγRIIb基因,成功构建原核表达重组质粒pET-sFcγRIIb,30℃10hIPTG诱导表达并纯化出41.5kDa的融合蛋白。结论获得重组人FcγRIIb胞外区蛋白,为以后人FcγRIIb胞外区蛋白功能的深入研究奠定基础。
%K sFcγRIIb基因
%K 载体构建
%K 诱导表达
%K 纯化
%U http://xbonline.nxmu.edu.cn/oa/DArticle.aspx?type=view&id=201111004