%0 Journal Article %T SARS冠状病毒核蛋白与mGM-CSF 融合质粒的构建及表达 %A 摆茹 %A 王希良 %A 周娅 %A 赵光宇 %A 韩岳 %A 罗德炎 %J 宁夏医科大学学报 %D 2005 %R 10.3969/j.issn.1674-6309.2005.02.002 %X 目的构建SARS冠状病毒(SARS-COV)核蛋白(N)与mGM-CSF的融合真核表达质粒,借助mGM-CSF的免疫佐剂作用,提高SARSDNA疫苗的免疫效果。方法采用PCR方法扩增N和mGM-CSF基因片段,用分子克隆和基因融合的方法将目的片段定向插入真核表达载体中,构建融合表达质粒pVAX1/N-mGM-CSF,并以融合质粒转染细胞,用免疫细胞化学和WesternBlot的方法鉴定融合质粒在体外的表达。结果经酶切鉴定及DNA序列测定证实融合质粒构建正确,细胞转染实验表明,融合质粒能在COS-7细胞中表达。结论成功构建SARS-COV核蛋白与mGM-CSF的融合表达质粒,重组质粒能在真核细胞内表达。 %K SARS冠状病毒 %K N蛋白 %K 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 %K 融合质粒 %U http://xbonline.nxmu.edu.cn/oa/DArticle.aspx?type=view&id=200502002