%0 Journal Article
%T 铜绿假单胞菌含Pilz结构域蛋白基因的克隆及原核表达
%A 黄卫东
%A 郭嘉义
%J 宁夏医科大学学报
%P 564-567
%D 2010
%X 目的克隆铜绿假单胞菌含Pilz结构域蛋白基因并构建其原核表达载体,为进一步研究这七种含Pilz结构域蛋白是否为第二信使c-di-GMP潜在的受体分子奠定实验基础。方法提取铜绿假单胞菌PAO1基因组DNA,用PCR方法从中扩增出七种功能未知的含Pilz结构域蛋白基因,将其克隆到原核表达载体pET32a中,在大肠杆菌BL21(DE3)中用IPTG诱导表达,表达产物通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定。结果成功扩增出七种含Pilz结构域蛋白基因并构建其原核表达载体,测序结果与NCBI数据库收录序列相一致。SDS-PAGE检验证明目的基因在大肠杆菌BL21中获得高效表达。结论从铜绿假单胞菌基因组中成功地克隆了七种含Pilz结构域蛋白基因,其构建的原核表达载体在大肠杆菌BL21中获得了高效表达。
%K 铜绿假单胞菌
%K c-di-GMP第二信使
%K Pilz结构域蛋白
%K 基因克隆
%K 原核表达载体构建
%U http://xbonline.nxmu.edu.cn/oa/DArticle.aspx?type=view&id=201005003